Réactif d'anticorps PCNA pour l'immunohistochimie

【Nom du produit 】

IHC Anticorps --  PCNA

【 Spécification d'emballage 】

【Utilisation prévue 】

Pour la recherche uniquement. Le réactif Anticorps PCNA est destiné à être utilisé pour identifier qualitativement PCNA par microscopie dans des coupes de tissu FFPE à l'aide d'un système de détection immunohistochimique.

【Principe 】_

PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen), joue un rôle central dans la coordination de l'association des facteurs de réplication lors de la réplication de l'ADN ainsi que lors de la reconnaissance et de la réparation des dommages à l'ADN. L'anticorps PCNA détecte les cellules proliférantes dans les cellules normales et tumorales. Il a été démontré que l'indice de marquage anti-PCNA est associé au pronostic tumoral. Ajouter l'anticorps primaire pour lier l'antigène sur les coupes de tissus, puis utiliser l'anticorps primaire de liaison d'anticorps secondaire marqué HRP pour former le complexe anticorps secondaire-anticorps primaire-antigène. Lorsqu'une solution chromogénique DAB est ajoutée, HRP réagit avec le substrat enzymatique pour produire un produit de réaction insoluble brun, ce qui indique indirectement l'existence d'un antigène. 

【Principaux composants 】

I immunoglobuline, diluant d'anticorps

【Stockage 】

Conserver à 2～8℃  pendant 18  mois 。

【Exemple d'exigences 】

Les tissus FFPE sont généralement coupés en sections aussi fines que 3 ～5 μ m avec un microtome.  Ces sections sont ensuite montées sur des lames de verre recouvertes d'un adhésif tissulaire.

【Protocole 】

1.  Préparation de l'échantillon ：Déparaffiner les lames dans du xylène Ⅰ , Ⅱ , Ⅲ  pendant 5 min utes ；Transférer les lames une fois dans des alcools à 100 %, 100 %, 95 % , 75 %  pendant 2 min utes  respectivement. Rincer les lames avec de l'eau déminéralisée pendant 30 secondes.

2 . Blocage ： Bloquer l'activité de la peroxydase endogène en incubant des coupes dans  une solution  de H ₂ O _{2 à 3 %} à température ambiante pendant 5 minutes pour  bloquer l'activité de la peroxydase endogène. Rincer les lames avec de l'eau déminéralisée pendant 30 secondes.

3 . Récupération d'antigène ：Chauffez le tampon de récupération d'antigène EDTA à 100 ℃ . Placez ensuite les lames dans le tampon bouilli et continuez à chauffer pendant 15 ～20 min. Refroidir naturellement pendant 30 minutes. Rincer l'échantillon avec un tampon de lavage.

4 . Incubation des anticorps primaires : Égoutter les lames. Ajouter l'anticorps primaire au tissu , incuber à température ambiante pendant  30 minutes . (utiliser un diluant d'anticorps ou du PBS comme contrôle) . Laver les lames dans du PBST 2 fois, 5 minutes à chaque fois. Si l'anticorps primaire est concentré, veuillez le diluer en RTU (prêt à l'emploi) conformément aux informations sur l'emballage . 

5.  Anticorps  secondaire : égoutter les lames. Ajouter l'anticorps secondaire au  tissu et incuber à température ambiante pendant  20 minutes . Laver les lames dans du PBST 2 fois, 5 minutes à chaque fois .

6. DAB ：Vidanger les lames. Ajouter DAB  au tissu et incuber à température ambiante pendant 5 min. Rincer les lames avec de l'eau déminéralisée.

7. Coloration à l'hématoxyline ：Vider les lames. Ajouter de l'hématoxyline au tissu et incuber à température ambiante pendant 5 minutes . Rincer les lames à l'eau. Utilisez la solution acide pour la différenciation . Rincer les lames à l'eau.

8. Déshydrater : déshydrater les lames dans des alcools à 75 % , 95 % et 100 %  pendant 2 minutes .  Séchez les lames. Couvrir le tissu taché avec une lamelle en utilisant un milieu de montage.

【Localisation positive 】

1. Localisation positive :  nucléaire .

2. Témoin positif :  cancer du sein .

【Précautions 】

1.  Veuillez lire attentivement les instructions et vous familiariser avec tous les composants du kit avant utilisation. Suivez strictement les instructions pendant le fonctionnement.

2.  NE PAS utiliser le kit ou tout composant du kit après leur.

3.  Seuls les professionnels formés peuvent utiliser ce kit. Veuillez porter une blouse de laboratoire et des gants jetables appropriés lors de la manipulation des réactifs.

4.  Éviter tout contact de la peau, des yeux et des muqueuses avec les produits chimiques.

5.  NE PAS pipeter à la bouche.

6.  Les réactifs non utilisés, le kit usagé et les déchets doivent être éliminés conformément aux réglementations locales.

【Fabricant 】_

Nom de la société : Xiamen Talent Biomedical Technology Co., Ltd

Adresse : No. 3rd and 4th Floors, Building B10, No. 2068 Wengjiao Road West, BioMedical Park, Haicang District, Xiamen City, 36100 China

Tél : +86 592 6315755            

Courriel : tlsw@talentbiomedical.com                

Site Web : www.talentbiomedical.com

【 Symboles 】