Réactif anticorps EGFR pour l'immunohistochimie

 【Nom du produit 】

Réactif anticorps EGFR —— Anticorps primaire

【Utilisation prévue 】

Pour la recherche uniquement. Le réactif anticorps EGFR  est destiné à être utilisé pour identifier qualitativement l'EGFR  par microscopie dans des coupes de tissu FFPE à l'aide d' un système de détection immunohistochimique .

【Principe 】_

L'EGFR est un membre de la famille des récepteurs du facteur de croissance de type  I  , qui est composé d'un domaine fonctionnel extracellulaire qui peut se lier au facteur de croissance épidermique, d'un court domaine transmembranaire et d'un domaine intracellulaire avec une activité tyrosine kinase. L'EGFR est exprimé dans de nombreux tissus normaux, en particulier dans la couche basale de l'épithélium stratifié et de l'épithélium squameux. La surexpression de l'EGFR se retrouve dans de nombreux types de tissus tumoraux, tels que les tumeurs du sein, de la vessie, des poumons, de l'estomac, de l'œsophage et de la tête et du cou.  Ajoutez l' anticorps primaire pour lier l' antigène sur les coupes de tissu , puis utilisez l'anticorps primaire de liaison de l'anticorps secondaire marqué HRP pour former le   complexe anticorps secondaire -  anticorps primaire -  antigène . Lorsqu'une solution chromogénique DAB est ajoutée, HRP réagit avec le substrat enzymatique pour produire un produit de réaction insoluble brun, ce qui indique indirectement l'existence d'un antigène. 

【Principaux composants 】

I immunoglobuline, diluant d'anticorps

【Stockage 】

Conserver à 2～8℃  pendant 18  mois 。

【Exemple d'exigences 】

Les tissus FFPE sont généralement coupés en sections aussi fines que 3 ～5 μ m avec un microtome.  Ces sections sont ensuite montées sur des lames de verre recouvertes d'un adhésif tissulaire.

【Protocole 】

1.  Préparation de l'échantillon ：Déparaffiner les lames dans du xylène Ⅰ , Ⅱ , Ⅲ  pendant 5 min utes ；Transférer les lames une fois dans des alcools à 100 %, 100 %, 95 % , 75 %  pendant 2 min utes  respectivement. Rincer les lames avec de l'eau déminéralisée pendant 30 secondes.

2 . Blocage ： Bloquer l'activité de la peroxydase endogène en incubant des coupes dans  une solution  de H ₂ O _{2 à 3 %} à température ambiante pendant 5 minutes pour  bloquer l'activité de la peroxydase endogène. Rincer les lames avec de l'eau déminéralisée pendant 30 secondes.

3 . Récupération d'antigène ：Chauffez le tampon de récupération d'antigène EDTA à 100 ℃ . Placer ensuite les lames dans le tampon bouilli et continuer à chauffer pendant 15 à 20 min. Refroidir naturellement pendant 30 minutes. Rincer l'échantillon avec un tampon de lavage.

4 . Incubation des anticorps primaires : Égoutter les lames. Ajouter l'anticorps primaire au tissu , incuber à température ambiante pendant  30 minutes . (utiliser un diluant d'anticorps ou du PBS comme contrôle) . Laver les lames dans du PBST 2 fois, 5 minutes à chaque fois. Si l'anticorps primaire est concentré, veuillez le diluer en RTU (prêt à l'emploi) conformément aux informations sur l'emballage . 

5.  Anticorps  secondaire : égoutter les lames. Ajouter l'anticorps secondaire au  tissu et incuber à température ambiante pendant  20 minutes . Laver les lames dans du PBST 2 fois, 5 minutes à chaque fois .

6. DAB ：Vidanger les lames. Ajouter DAB  au tissu et incuber à température ambiante pendant 5 min. Rincer les lames avec de l'eau déminéralisée.

7. Coloration à l'hématoxyline ：Vider les lames. Ajouter de l'hématoxyline au tissu et incuber à température ambiante pendant 5 minutes . Rincer les lames à l'eau. Utilisez la solution acide pour la différenciation . Rincer les lames à l'eau.

8. Déshydrater : déshydrater les lames dans des alcools à 75 % , 95 % et 100 %  pendant 2 minutes .  Séchez les lames. Couvrir le tissu taché avec une lamelle en utilisant un milieu de montage.

【Localisation positive 】

1.  Localisation positive : membrane cellulaire / cytoplasme.

2.  Contrôle positif : tissu placentaire.

【Précautions 】

1.  Veuillez lire attentivement les instructions et vous familiariser avec tous les composants du kit avant utilisation. Suivez strictement les instructions pendant le fonctionnement.

2.  NE PAS utiliser le kit ou tout composant du kit après leur .

3.  Seuls les professionnels formés peuvent utiliser ce kit. Veuillez porter une blouse de laboratoire et des gants jetables appropriés lors de la manipulation des réactifs.

4.  Éviter tout contact de la peau, des yeux et des muqueuses avec les produits chimiques.

5.  NE PAS pipeter à la bouche.

6.  Les réactifs non utilisés, le kit usagé et les déchets doivent être éliminés conformément aux réglementations locales.

【Fabricant 】_

Nom de la société : Xiamen Talent Biomedical Technology Co., Ltd

Adresse : n° 3 et 4 étages, bâtiment B10, n° 2068 Wengjiao Road West, parc biomédical, district de Haicang, ville de Xiamen, 36100 Chine

Tél : +86 592 6315755            

Courriel : tlsw@talentbiomedical.com                

Site Web : www.talentbiomedical.com

【 Symboles 】